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通过Haa1转录因子改善酵母对乙酸的耐受性
2020-01-05 191

巴黎人线上注册,转录因子Haa1除了在酿酒酵母中作为对乙酸的反应的主要调节剂,也是乙酸耐受性的重要决定因素。因此,通过过表达或诱变的方式对Haa1进行工程化改造能够提高菌株的乙酸耐受性,获得鲁棒性更强的菌株。

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通过将全局转录机制工程的概念应用于特异性转录因子Haa1,可以选择含有两个点突变的突变等位基因,其导致与野生型等位基因相比更高的乙酸耐受性。乙酸耐受性的改善水平与通过过表达HAA1的获得的水平相当。通过对两个点突变进行解析,结果显示乙酸耐受表型的改善主要是因为135位的氨基酸交换引起的。为进一步研究耐受表型机制,将Haa1易位和Haa1转录激活基因在高产菌株和野生型菌株中进行比较。虽然Haa1S135F突变菌株中Haa1从细胞溶胶到细胞核的快速转移不受乙酸的影响,但是突变菌株细胞中乙酸对四种Haa1靶基因的转录激活水平与野生型菌株的细胞相比显着更高。有趣的是,突变体和野生型菌株对于乙酸的转录激活的响应时间是相当的,而获得的最大mRNA水平与每个菌株的耐受水平相关。 研究数据表明,调节子特异性转录因子Haa1能够改善酿酒酵母的乙酸耐受性。而且,在目前的工作中鉴定的有益的S135F突变不导致HAA1转录物水平的增加,表明Haa1S135F突变蛋白的结构导致转录机制的增加招募Haa1靶基因。

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